性激素放免檢測試劑盒使用說明
1.樣品測定的準備：(注意：樣品裂解需在4℃或冰上操作)
對于貼壁細胞：
吸除培養液，按照6孔板每孔加入200微升裂解液的比例(即相當于細胞培養液量2毫升的1/10)加入裂解液，裂解細胞。裂解細胞時為了裂解充分，可以使用移液器進行反復吹打或晃動培養板使裂解液充分接觸并裂解細胞。通常細胞在接觸裂解液后會立即裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續的測定。
對于懸浮細胞：
用離心管離心沉淀細胞，棄上清，輕輕彈散細胞，按照6孔板每孔的細胞量加入200微升裂解液的比例加入裂解液，裂解細胞。裂解細胞時為了裂解充分可以彈擊離心管管底或適當Vortex使裂解液充分接觸并裂解細胞。通常細胞在接觸裂解液后會立即裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續的測定。
對于組織樣品：
按照每20毫克組織加入約100-200微升裂解液的比例加入裂解液，然后用玻璃勻漿器或其它勻漿器進行勻漿。充分勻漿可以確保組織被*裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續的測定。
2.標準曲線測定的準備：
冰浴上溶解待用試劑，把ATP標準溶液用ATP檢測裂解液稀釋成適當的濃度梯度。具體的濃度需根據樣品中ATP的濃度而定。初次檢測可以檢測0.1、1和10微摩爾/升這幾個濃度，在后續的實驗中更據樣品中ATP的濃度對標準品的濃度進行適當調節。
3.ATP檢測工作液的配制：
按照每個樣品或標準品需100微升ATP檢測工作液的比例配制適當量的ATP檢測工作液。把待用試劑在冰浴上溶解。取適當量的ATP檢測試劑，按照1:100的比例用ATP檢測試劑稀釋液稀釋ATP檢測試劑。例如50微升ATP檢測試劑可以加入5毫升ATP檢測試劑稀釋液配制成5毫升ATP檢測工作液。稀釋后的ATP檢測試劑即為用于后續實驗的ATP檢測工作液。ATP檢測工作液可在冰浴上暫時保存。
更新時間：2018-11-10 
瀏覽次數：1741
您的位置：
